動物魚類蛋白質(zhì)的測定方法
作者：祎鴻儀器 點擊率： 發(fā)布時間：2017-11-20 17:48:00
魚粉是一種重要的蛋白質(zhì)原料，其安全性問題不能忽略。安全性主要體現(xiàn)在是否有藥物和有毒物質(zhì)殘留，具體檢測的指標包括新鮮度、藥物殘留、衛(wèi)生指標等。魚粉的新鮮度差，會嚴重降低魚粉的品質(zhì)，甚至喪失飼用價值。筆者著重討論可標識魚粉新鮮度的揮發(fā)性鹽基氮（ＶＢＮ）含量的檢測。
?。郑拢问侵竸游镄允澄镉捎诿负图毦淖饔?，
在腐敗過程中，蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及含氮胺類物質(zhì)。此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，在堿性溶液中蒸出后，用標準酸液滴定從而計算含量。本試驗根據(jù)此原理，在半微量檢測方法的基礎(chǔ)上改良，使檢測更簡易、快捷。
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?。保保保パ趸V混懸液
分析純氧化鎂１．０ｇ溶于１００ｍＬ蒸餾水中，振搖成混懸液。
１．２２％硼酸吸收液
分析純硼酸２ｇ溶于１００ｍＬ蒸餾水。
?。保常埃保恚铮欤帖}酸標準液
吸取分析純鹽酸８．３ｍＬ，用蒸餾水定容至
１０００ｍＬ，用無水碳酸鈉標定。１．４０．０１ｍｌ／Ｌ鹽酸標準液
用０．１ｍｏｌ／Ｌ鹽酸標準溶液稀釋。
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甲基紅０．１％乙醇溶液，溴甲酚綠０．５％乙醇溶液，兩溶液等體積混合，陰涼處保存３個月以內(nèi)。
?。矁x器
?。玻?a href="http://www.mk416.com/article/type/83-1.html">全自動凱氏定氮儀２．２磁力攪拌器２．３離心機２．４消化管
２．５滴定管最小分度０．０１ｍＬ３分析步驟３．１樣品處理
稱?。保埃玺~粉（精確至±０．０００１）于２５０ｍＬ錐形瓶中，加１００ｍＬ（Ｖ總）蒸餾水，于磁力攪拌器上攪拌３０ｍｉｎ，４０００ｒ／ｍｉｎ。
３．２蒸餾滴定
吸?。玻埃埃恚蹋玻ヅ鹚嵛找河阱F形瓶中，加混合指示劑２￣３滴，使ＫＤＮ－２Ｃ型定氮儀的冷凝管末端浸入此溶液。準確吸?。保埃埃恚蹋ǎ址郑┥鲜鰳悠非逡河谙苤?，加少量蒸餾水沖洗，再加入１０ｍＬ１％的氧化鎂溶液，蒸餾至１５０ｍＬ（約
?。担恚椋睿?。吸收液立即用０．０１ｍｏｌ／Ｌ鹽酸標準溶液滴
定，溶液由藍綠色變?yōu)榛壹t色為終點，同時做試劑空白。
４計算
揮發(fā)性鹽基氮（Ｗ）以每１００ｇ樣品含氮ｍｇ數(shù)表示。
Ｗ（ｍｇ／１００ｇ）＝Ｃ×（Ｖ１－Ｖ２）×１４ｍ×
?。ǎ址秩。挚偅粒保埃?/div>
?。祝瓨悠分袚]發(fā)性鹽基氮的含量，ｍｇ／１００ｇ；Ｖ１－測定試樣所消耗鹽酸標準溶液體積，ｍＬ；Ｖ２－試劑空白消耗鹽酸標準溶液體積，ｍＬ；Ｃ－鹽酸標準溶液的實際濃度，ｍｏｌ／Ｌ；
?。保矗c１．００ｍＬ標準標準滴定溶液［ｃ（ＨＣｌ）＝１．０００ｍｏｌ／Ｌ］相當?shù)牡馁|(zhì)量，ｍｇ；
檢測分析
?。模澹簦澹颍恚椋睿幔簦椋铮睿幔睿洌粒睿幔欤螅椋?/div>
ｍ－樣品質(zhì)量，ｇ。
結(jié)果的表述：取兩次結(jié)果的平均值，保留３位有效數(shù)字。
溫度對ＶＢＮ含量的影響
磁力攪拌過程也要維持一定的溫度，溫度越高，ＶＢＮ含量越大，檢驗的誤差越大（表２）。
?。翟试S差
相對誤差≤１０％。
溫度ＶＢＮ（ｍｇ／１００ｇ）
?。保埃担保埃福保玻玻保担?/div>
２０℃２５℃３０℃３２℃
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６．１時間
?。郑拢蔚臋z測反映的是魚粉腐敗過程所產(chǎn)生的
氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)，因此，離心后的樣液應(yīng)馬上檢測。筆者以粗蛋白質(zhì)含量為６５％的進口秘魯魚粉為例，對比時間對ＶＢＮ含量的影響（表１）。
時間
以上表明，磁力攪拌中控制溫度在２０￣２５℃最佳。
?。菲渌?/div>
７．１魚粉執(zhí)行質(zhì)量標準（魚粉ＧＢＴ１９１６４－２００３）
主要技術(shù)參數(shù)
項目粗蛋白質(zhì)／％
時間對ＶＢＮ含量的影響
?。郑拢危ǎ恚纾保埃埃纾?/div>
?。保罚担保担福保常常保保玻保埃叮保埃?/div>
魚粉ＧＢＴ１９１６４－２００３
指標
特級品一級品二級品三級品
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≥６５≥６０≥５５≥５０≤１５０
揮發(fā)性鹽基氮ＶＢＮ（ｍｇ／１００ｇ）≤１１０≤１３０≤１５０
７．２本檢測方法可推廣應(yīng)用至其他的動物性蛋
以上表明，試液應(yīng)在５ｍｉｎ以內(nèi)進行測定。
白質(zhì)飼料，例如血漿蛋白粉、血球蛋白粉，等等。
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